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微生物乙酰乙酰辅酶A(AA-CoA)ELISA试剂盒使用说明书‌

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  微生物乙酰乙酰辅酶A(AA-CoA)ELISA试剂盒使用说明书‌

  BS-0029-WA微生物乙酰乙酰辅酶A(AA-CoA)ELISA科研试剂盒

  BS-0029-WB微生物乙酰乙酰辅酶A(AA-CoA)ELISA科研试剂盒

  版本:2025.10‌

  一、实验原理‌

  本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测微生物样本中的AA-CoA浓度。预包被抗AA-CoA抗体的微孔板中依次加入样本/标准品,与生物素标记的二抗形成复合物,经HRP-链霉亲和素催化TMB显色,450nm测定吸光度(OD值),浓度与OD值呈正比‌。

  二、试剂组成‌

  组分 规格(48T/96T) 保存条件

  预包被微孔板 1×8条/12条 2-8℃(避光)

  AA-CoA标准品 1瓶(冻干) -20℃

  生物素标记抗体 1瓶(60μL) -20℃(避光)

  HRP-链霉亲和素 1瓶(60μL) -20℃(避光)

  TMB显色液 1瓶(11mL) 2-8℃(避光)

  终止液(2M H₂SO₄) 1瓶(6mL) 室温

  注:其余缓冲液(洗涤液、封闭液等)详见试剂盒内说明书。

  三、样本处理‌

  微生物培养液‌:

  离心(3000g,10min)收集上清,0.22μm滤膜除菌‌。

  若浓度过高,用PBS稀释(建议1:5~1:10)。

  菌体裂解液‌:

  超声破碎(冰浴,功率200W,3s/间隔10s,重复30次)‌。

  离心(8000g,4℃,10min)取上清‌。

  四、实验步骤‌

  标准曲线制备‌:将标准品梯度稀释(0.5~20 U/mL)。

  加样‌:每孔加入50μL样本/标准品,37℃孵育1h‌。

  洗涤‌:弃液后拍干,PBST洗涤3次(每次30s)‌。

  显色‌:加入100μL TMB底物,避光孵育15min。

  终止‌:加入50μL终止液,30min内测OD450‌。

  五、数据分析‌

  浓度计算‌:根据标准曲线回归方程(y=ax+b)计算样本浓度‌。

  灵敏度‌:0.19 ng/mL(检测限)‌。

  六、注意事项‌

  避免反复冻融样本,分装后-80℃保存。

  溶血或高脂样本需离心处理。

  不同批次试剂不可混用。

  注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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