微生物乙酰乙酰辅酶A(AA-CoA)ELISA试剂盒使用说明书 BS-0029-WA微生物乙酰乙酰辅酶A(AA-CoA)ELISA科研试剂盒 BS-0029-WB微生物乙酰乙酰辅酶A(AA-CoA)ELISA科研试剂盒 版本:2025.10 一、实验原理 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测微生物样本中的AA-CoA浓度。预包被抗AA-CoA抗体的微孔板中依次加入样本/标准品,与生物素标记的二抗形成复合物,经HRP-链霉亲和素催化TMB显色,450nm测定吸光度(OD值),浓度与OD值呈正比。 二、试剂组成 组分 规格(48T/96T) 保存条件 预包被微孔板 1×8条/12条 2-8℃(避光) AA-CoA标准品 1瓶(冻干) -20℃ 生物素标记抗体 1瓶(60μL) -20℃(避光) HRP-链霉亲和素 1瓶(60μL) -20℃(避光) TMB显色液 1瓶(11mL) 2-8℃(避光) 终止液(2M H₂SO₄) 1瓶(6mL) 室温 注:其余缓冲液(洗涤液、封闭液等)详见试剂盒内说明书。 三、样本处理 微生物培养液: 离心(3000g,10min)收集上清,0.22μm滤膜除菌。 若浓度过高,用PBS稀释(建议1:5~1:10)。 菌体裂解液: 超声破碎(冰浴,功率200W,3s/间隔10s,重复30次)。 离心(8000g,4℃,10min)取上清。 四、实验步骤 标准曲线制备:将标准品梯度稀释(0.5~20 U/mL)。 加样:每孔加入50μL样本/标准品,37℃孵育1h。 洗涤:弃液后拍干,PBST洗涤3次(每次30s)。 显色:加入100μL TMB底物,避光孵育15min。 终止:加入50μL终止液,30min内测OD450。 五、数据分析 浓度计算:根据标准曲线回归方程(y=ax+b)计算样本浓度。 灵敏度:0.19 ng/mL(检测限)。 六、注意事项 避免反复冻融样本,分装后-80℃保存。 溶血或高脂样本需离心处理。 不同批次试剂不可混用。 注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒 天津天正信达供应:RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材,开云在线登录拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台,主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。
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