大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒实验原理 BS-3378 大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒 一:实验原理 大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒的实验原理基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,其核心步骤如下: 1. 包被抗体固定 捕获抗体(包被抗体)预先包被在微孔板表面,与样本中的目标蛋白(GHRP)特异性结合。 2. 样本孵育与结合 加入待测样本(如大鼠血清、血浆等),目标蛋白与包被抗体形成“抗原-抗体"复合物。 3. 酶标抗体显色 加入酶标记的检测抗体,与目标 蛋白的另一表位结合,形成“夹心"结构。随后加入底物(如TMB),在酶催化下显色,颜色深浅与目标蛋白浓度成正比。 4. 终止与检测 加入终止液终止反应,通过酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值),根据标准曲线计算样本中GHRP的浓度。  关键特性 灵敏度:依赖抗体配对的特异性,通常可检测pg/mL级浓度。 样本类型:适用于血清、血浆、细胞培养上清等。 标准化:需通过标准品建立浓度-信号曲线,确保定量准确性。 三、操作流程 样本前处理 血清/血浆:离心后取上清,1:5稀释(避免溶血样本)。 组织匀浆:PBS研磨后离心,取上清检测。 检测步骤 标准品梯度稀释(0/5/20/50/100 pg/mL)。 每孔加100μL标准品/样本,37℃孵育90分钟。 洗涤后加100μL生物素二抗,37℃孵育30分钟。 加100μL HRP-链霉亲和素,避光孵育20分钟。 显色10分钟,加终止液后30分钟内读450nm。 数据分析 标准曲线拟合:四参数逻辑回归(4PL)。 样本浓度=标准曲线值×稀释倍数。 注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒 天津天正信达供应:RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材,开云在线登录拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台,主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。 |