如何正确操作人γ干扰素ELISA试剂盒?

　　如何正确操作人γ干扰素ELISA试剂盒?

　　人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒的正确操作流程如下，结合了不同来源的可靠信息：

　　实验前准备

　　试剂平衡‌：将试剂盒从冰箱取出，在室温下平衡20-30分钟，使试剂温度与实验室环境一致‌。

　　样本处理‌：避免使用溶血样本，因血红蛋白可能干扰HRP标记的ELISA检测，导致假阳性‌。血清/血浆样本需离心去除杂质，细胞上清需过滤。

　　标准品稀释‌：按说明书梯度稀释标准品(如1000 pg/mL至15.6 pg/mL)，第8孔为空白对照。

　　操作步骤

　　加样‌：

　　每孔加入100μL标准品或待测样本，避免气泡和孔壁污染‌。

　　加样顺序需一致，减少时间差误差‌。

　　孵育‌：

　　37℃孵育90分钟(抗原-抗体结合)。

　　洗涤3次，每次浸泡30秒，拍干孔内液体‌。

　　检测抗体与显色‌：

　　加入HRP标记抗体，37℃孵育60分钟。

　　洗涤后加入TMB底物，避光孵育10-20分钟‌。

　　终止与读数‌：

　　每孔加入50μL终止液，立即用酶标仪读取450nm吸光度‌。

　　注意事项

　　试剂保存‌：未使用板条需密封防潮，不同批号试剂勿混用。

　　安全防护‌：避免接触终止液和底物，操作时佩戴手套。

　　数据准确性‌：每次实验需做标准曲线，样本建议复孔检测。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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