以下是细胞培养皿使用避坑手册,综合规格选择与操作注意事项,结合多来源信息整理:
一、培养皿规格选择指南
常见规格与适用场景
35mm(直径):适合小规模实验(如神经元、淋巴细胞),加液量3mL,产量约200万细胞/皿。
60mm:中等规模(成纤维细胞、肝细胞),加液量5mL,产量约500万细胞/皿。
100mm:常用规格,工业级生产或高通量筛选,产量可达1370万细胞/皿。
150mm及以上:需超大表面积(如工业培养)时选择。
材质选择
玻璃培养皿:可高温灭菌,适合重复使用,但易碎。
塑料培养皿:多为一次性PE材质,避免交叉污染,适合细菌划线。
二、操作注意事项
灭菌与清洁
玻璃培养皿:新购需1-2%盐酸浸泡去碱性,高压灭菌(121℃, 30分钟)或干热灭菌(120℃, 2小时)。
塑料培养皿:预灭菌包装可直接使用,重复使用需环氧乙烷或紫外线灭菌。
加液与培养
培养基量:一般为生长面积的0.2-0.3倍(如100mm皿加10-15mL)。
操作规范:
避免手部遮挡瓶口,灼烧后开盖。
加液后立即盖盖,防止污染。
特殊场景处理
霉菌培养:需正置放置,防止孢子扩散。
倒置培养:贴壁细胞需倒置,避免冷凝水滴落。
三、常见问题与避坑点
污染风险:
枪头勿混用,操作时避免讲话。
定期检查培养皿有无裂纹或污染。
细胞产量:
细胞量与生长面积成正比,避免过度拥挤。
四、推荐操作流程
根据实验需求选择规格和材质。
严格灭菌后,在超净台内操作(酒精灯旁灼烧)。
倒置培养,定期观察菌落或细胞状态。
注:以上资料仅供参考,如需进一步了解产品详情,可参考品牌供应商或技术老师。
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