人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒实验使用说明书 以下是关于人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理： BS-0186 人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒 一、实验原理 采用双抗体夹心法(或双抗原夹心法)检测样本中KGF浓度。通过包被抗体/抗原与待测物结合，再与酶标抗体形成复合物，经TMB显色后测定OD值，浓度与颜色深浅成正比。 二、试剂盒组成 主要组分 预包被微孔板(96孔或48孔) 标准品(冻干粉，通常含2-8管，浓度0-400 pg/mL不等) 酶标抗体、生物素化抗体、HRP标记亲和素(不同品牌配置差异) TMB底物液、终止液(2N H₂SO₄) 浓缩洗涤液(需20-30倍稀释) 自备物品 酶标仪(450nm)、移液器及枪头 37℃恒温箱、蒸馏水 三、样本处理 样本类型 处理方法 血清 室温凝固10-20分钟后，2000-3000rpm离心20分钟，避免溶血 血浆 EDTA/肝素抗凝，离心后取上清 细胞上清 1000-3000rpm离心10-20分钟去除颗粒 组织匀浆 PBS匀浆后离心取上清，分装保存于-20℃ 注意：避免反复冻融;NaN₃会抑制HRP活性，需排除此类样本。 四、操作步骤 试剂准备 标准品复溶：加入指定体积稀释液(如0.5-1mL)，静置10分钟混匀。 洗涤液稀释：按1:19~1:20比例用蒸馏水配制。 检测流程 加样：标准品/样本每孔50-100μL。 孵育：37℃温育60-120分钟。 洗板：手工或洗板机洗涤4-6次，拍干。 加酶标抗体：每孔100μL，37℃孵育60分钟。 显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。 终止：加入终止液后15分钟内测定450nm OD值。 五、注意事项 保存条件：未开封试剂盒2-8℃保存;溶解后标准品建议分装冻存。 精密度：批内CV<10%，批间CV<12%。 干扰因素：溶血、细菌污染、反复冻融可能导致假阳性或浓度偏差。 注：以上资料仅供参考，如需具体品牌说明可进一步提供货号查询详细参数。 | 
