以下是关于人脂联素(ADP)ELISA试剂盒的实验使用说明书综合整理： BS-1528人脂联素(ADP)ELISA试剂盒 一、实验原理 采用双抗体夹心法检测样本中ADP含量。通过抗-ADP抗体包被微孔板捕获ADP，再与HRP标记的ADP抗体结合形成复合物，经TMB显色后测定450nm吸光度(OD值)，颜色深浅与ADP浓度呈正相关。 二、试剂盒组成 组分 规格(96T) 保存条件 预包被酶标板 1×96孔 2-8℃干燥 标准品 0.5ml×1瓶(1350μg/L) 2-8℃冷藏 酶标试剂(HRP标记) 6ml×1瓶 2-8℃避光 显色剂A/B液 各6ml×1瓶 2-8℃避光 20×浓缩洗涤液 50ml×1瓶 2-8℃冷藏 终止液 6ml×1瓶 常温保存 三、样本处理要求 血清/血浆 室温凝固10-20分钟后离心(2000-3000rpm，20分钟)，避免溶血 血浆推荐使用EDTA或肝素抗凝 细胞培养上清 直接离心取上清，或PBS稀释细胞悬液后冻融裂解 组织样本 需用PBS匀浆后离心，分装保存于-20℃ 注意事项 含NaN3的样本会HRP活性，需避免使用 反复冻融不超过3次 四、操作步骤(以96孔板为例) 标准品稀释 将1350μg/L标准品按梯度稀释(如：1350→675→337.5→168.75→84.38→42.19→21.09→0μg/L) 加样孵育 标准品孔/样本孔各加100μl，37℃孵育120分钟 洗涤 用1:20稀释的洗涤液洗板5次，每次静置10-20秒 加酶标试剂 每孔加HRP标记抗体50μl，37℃孵育60分钟 显色与终止 加TMB底物A/B液各50μl，避光反应15分钟后加终止液50μl 五、结果计算 以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线 检测范围通常为21.09-1350μg/L，灵敏度可达0.01μg/ml 六、注意事项 试剂使用前需室温平衡30分钟，浓缩洗涤液结晶需37℃孵育15分钟 显色时间超过20分钟可能导致背景过高 不同批号试剂不可混用 注，以上资料仅供参考，如需具体品牌说明书，可参考本生、天正信达或分细生物的详细文档。 天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒 | 
