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氨基酸脱羧酶(AAD)试剂盒活性说明书

发表时间:2025/8/5  |  点击率:56
 
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  以下是微生物氨基酸脱羧酶(AAD)ELISA试剂盒的活性检测规范说明:

  一、检测原理‌

  采用双抗体夹心法ELISA技术,通过HRP酶催化TMB显色反应,在450nm波长下测定吸光度(OD值),OD值与样品中AAD活性呈正相关。

  二、关键参数‌

  参数‌ ‌标准值‌

  检测范围‌ 25-400 U/L(S1-S5)

  灵敏度‌ 检测限25 U/L

  线性范围‌ R²≥0.99

  三、标准品稀释方法‌

  溶解操作‌

  冻干标准品离心后,用标准品稀释液(含1% BSA的PBS)缓慢溶解,静置15分钟

  梯度稀释:取250μL标准品原液加入等体积稀释液,倍比稀释至S0(0 U/L)

  活性计算‌

  标准曲线拟合:以S0-S5浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线

  样品活性=实测OD值对应浓度×稀释倍数(通常为5倍)

  四、样品处理要求‌

  样本类型‌

  微生物提取液:1000×g离心20分钟,取上清检测

  细胞上清:同法离心后直接检测或稀释

  保存条件‌

  分装后-20℃冻存,避免反复冻融

  五、操作注意事项‌

  干扰物质‌:样本中禁止含NaN3(HRP抑制剂)

  孵育时间‌:各步骤需严格按说明书时间控制(如37℃ 1小时)

  洗涤规范‌:手工洗板需拍干5次,自动洗板机每孔注入350μL洗液

  注:不同厂家试剂盒参数可能存在差异,请以实际产品说明书为准。

  注:以上资料仅供参考,具体详情来咨询技术 老师或品牌供应商。

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