ELISA实验:血清样本操作参考
ELISA实验血清样本全流程操作参考,覆盖采集、处理、保存全环节关键参数:
操作环节 具体参数要求
血液采集 采血管:无抗凝剂、无热原/内毒素试管;推荐采血量:3~5mL
凝固处理 室温静置30min~2h自然凝固,或4℃冰箱过夜静置
离心分离 离心条件:4℃,1000×g 离心15~20min(或3000转/分 离心10min)
样本用量 常规检测单孔需50~100μl血清,做复孔需预留2倍以上体积
短期保存 2~8℃密封存放,最长可保存7天
长期冻存 分装为100~200μl/管,-20℃可保存1个月,-80℃可保存6个月以上
样本复融 取出后置于室温环境缓慢均衡至融化,轻柔颠倒混匀
异常样本处理 出现沉淀/絮状物:4℃ 1000×g再次离心10min,取上清检测;轻度高脂样本可按1:4比例用生理盐水稀释后检测
注意事项:
全程避免剧烈摇晃,防止机械性溶血
禁止高温加热促凝,避免蛋白变性失活
小心吸取上层淡黄色清亮血清,严禁触碰下层血细胞层
提前预估检测指标数量,预留充足样本量备用
仅适用于3天内可完成检测的无菌分离样本,有菌样本禁止2~8℃长期存放
严格避免反复冻融,冻存管标注清晰样本编号、采集日期
禁止水浴加热快速融解,禁止剧烈涡旋振荡
重度溶血、严重脂血、细菌污染样本直接弃用,避免造成假阳性/假阴性结果
注:以上科研产品资料供参考,具体可咨询技术老师!
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