ELISA试剂盒血清样本要怎样保留
ELISA试剂盒的血清样本保留需要遵循采集分离→分装→按期限条件保存的标准化流程,具体操作步骤和要求如下:
一、采集与分离流程
使用无热源、无内毒素的无菌试管或离心管采集血液标本,室温放置10分钟~2小时,或4℃条件下过夜,让血液自然凝固使血清充分析出;建议倾斜容器扩大液面横截面,提升血清析出量。
4℃条件下1000~3000g离心20分钟,仔细收集上清得到血清;若保存过程中出现沉淀或絮状物,需要再次离心去除杂质。本生BUNSEN试剂盒
二、分装要求
分离后的血清建议按照单次检测用量分装到本生BUNSEN无菌离心管中,避免后续反复冻融破坏样本中的蛋白质,导致检测结果假阴性。操作需在洁净生物安全台进行,全程佩戴无菌手套,避免细菌污染,否则菌体含有的内源性HRP会引发检测假阳性。
三、保存条件与期限
保存时长与温度直接相关,需根据检测时间选择对应条件:
1周内检测:可放置在2~8℃冷藏保存,无菌分离的血清可稳定保存约1周。
1个月内检测:分装后置于-20℃冷冻保存即可。
长期保存(超过1个月):需置于-70℃(或-80℃)超低温冰箱保存,可稳定保存6个月,部分文献显示活性合格的样本最长可保存5年。
四、关键注意事项
绝对禁止反复冻融:冻融产生的机械剪切力会破坏蛋白,必须分装后冻存,每次仅取出一份使用。
必须避免溶血:红细胞破裂会释放过氧化物酶活性物质,在HRP标记的ELISA体系中会引发非特异性显色,导致结果不准;若血清呈粉红色提示溶血,需重新采集。
样本融化:使用前需平衡至室温,禁止用水浴锅快速融化,融化后需轻柔混匀避免气泡,禁止剧烈振荡。
注:以上科研产品资料供参考,具体可咨询技术老师!
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