ELISA实验:酶联免疫吸附测定原理与应用方向
ELISA的原理和应用方向其实很清晰,核心是利用抗原抗体的特异性结合和酶的高效催化来实现高灵敏度的检测。下面天正信达帮你梳理一下:
一、ELISA基本原理
固相化:将抗原或抗体固定在固相载体(如微孔板)表面,保持其免疫活性。
酶标记:将另一种抗体或抗原与酶(如辣根过氧化物酶HRP)连接,形成酶标复合物,该复合物同时保留免疫活性和酶活性。
特异性结合:加入待测样本,样本中的目标物(抗原或抗体)与固相载体或酶标复合物发生特异性结合。
洗涤分离:洗去未结合的物质,只留下特异性结合的复合物。
酶促显色:加入酶的底物,酶催化底物产生有色产物,颜色深浅与样本中目标物浓度成正比。
定量检测:用分光光度计测定颜色强度,通过标准曲线计算样本中目标物的精确浓度。
二、ELISA应用方向
ELISA应用广泛,主要包括:
疾病诊断:检测病原体或其抗体。
疾病监测与普查:大规模筛查疾病或检测人群免疫水平。
法医与兽医检测:用于毒物检测、动物疫病诊断等。
农业与植物病理学:检测植物病原体或转基因成分。
科研与药物开发:定量检测细胞因子、激素、药物等生物分子。
三、ELISA主要类型
间接法:检测抗体。抗原包被固相板,加入待测抗体,再用酶标二抗检测。
夹心法:检测大分子抗原。先包被捕获抗体,加入样本,再用酶标检测抗体。
竞争法:检测小分子抗原或半抗原。样本抗原与酶标抗原竞争结合固相抗体。
注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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