ELISA试剂盒测定原理有哪些

　　ELISA试剂盒测定原理有哪些

　　ELISA试剂盒的测定原理基于抗原-抗体特异性结合和酶催化显色反应，通过颜色变化实现目标物的定性与定量分析。其核心步骤包括：将抗原或抗体固定于固相载体表面，加入待测样本后形成免疫复合物，经洗涤后加入酶标记的检测抗体或抗原，最后通过底物显色反应测量吸光度值。

　　一、基本原理

　　抗原-抗体特异性结合‌：目标分子与对应抗体通过生物分子间的互补结构形成稳定复合物，具有高特异性和灵敏度。

　　酶标记与信号放大‌：酶(如辣根过氧化物酶)与抗体或抗原偶联，加入底物后产生颜色信号，显色强度与目标物浓度成正比。

　　定量分析‌：通过酶标仪测量吸光度(OD值)，结合标准曲线计算目标物浓度。

　　二、常用检测模式

　　直接法‌：抗原包被于固相载体，直接加入酶标记的一抗检测。操作简便，但需为每种抗原制备特异性酶标一抗，通用性低。

　　间接法‌：一抗与抗原结合，再加入酶标记的二抗检测。灵敏度高，常用于抗体检测。

　　夹心法‌：两个抗体夹抗原形成三明治结构，适用于大分子抗原检测。

　　竞争法‌：标本中的抗原与酶标抗原竞争结合固相抗体，适用于小分子抗原及半抗原检测。

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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