多酚氧化酶(PPO)测试盒应该怎么使用
多酚氧化酶(PPO)测试盒使用步骤
试剂准备
使用前将试剂充分混匀,按说明书准确稀释,避免浓度偏差。
若为微板法,需检查微孔板是否完好,确保与试剂兼容。
样品处理
植物样本(如马铃薯)需低温保存,避免酶活性损失。
称取5g组织,加入缓冲液研磨成匀浆,离心后取上清液定容。
土壤样本需按试剂盒要求预处理,避免引入抑制剂。
酶活测定
分光光度法:
设置对照管与测定管,加入邻苯二酚底物,37℃水浴反应10分钟。
加入溶液终止反应,离心后测定525nm吸光值。
微板法:
按试剂盒步骤加样,避免气泡,使用微孔板读取吸光度。
结果计算
酶活性单位定义为1g鲜样1分钟内吸光值变化0.01所需的酶量。
注意事项
严格控制反应温度、时间及pH值。
设置空白对照和重复样本,提高数据可靠性。
实验后及时清洗器具,避免交叉污染。
需要帮你整理一份不同样本(植物/土壤)的预处理对照表吗?
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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