如何判断样本是否在检测范围内?

　　如何判断样本是否在检测范围内?

　　在ELISA实验中，判断样本是否在检测范围内是确保结果准确性的关键步骤。以下是具体判断方法和注意事项：

　　一、通过标准曲线判断

　　OD值范围比对‌

　　将样本的吸光度(OD值)与标准曲线中低浓度标准品(如2.5 pg/mL)的OD值对比‌。若样本OD值低于低标准品，说明浓度低于检测下限(2.5 pg/mL)，需稀释后复测;若高于最高标准品(如80 pg/mL)，则需稀释样本‌。

　　示例‌：某试剂盒检测范围为2.5–80 pg/mL，若样本OD值为0.1(低于2.5 pg/mL对应的OD值)，则需稀释‌。

　　标准曲线拟合度‌

　　标准曲线的R²值应≥0.99，且OD值需随浓度递减呈规律性变化‌。若样本OD值偏离曲线趋势，可能提示样本浓度超出线性范围或存在干扰‌。

　　二、通过复孔数据验证

　　变异系数(CV)‌：复孔检测的CV应<10%‌。若样本OD值差异过大(如CV>15%)，可能因浓度过高导致反应不均，需稀释后重测‌。

　　三、注意事项

　　稀释方法‌：超出范围的样本需用样本稀释液按比例稀释(如1:2、1:5)，避免直接稀释导致误差‌。

　　试剂盒灵敏度‌：不同试剂盒检测范围不同(如2.5–80 pg/mL‌或15.6–1000 pg/mL‌)，需根据说明书调整判断标准。

　　仪器校准‌：确保酶标仪波长设置为450 nm(TMB底物)，避免因仪器误差导致OD值异常‌。

　　若需进一步了解ELISA操作细节，可参考上述实验指南视频。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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