Elisa实验—酶联免疫吸附法试剂盒
ELISA(酶联免疫吸附法)试剂盒是一种基于抗原-抗体特异性结合原理的免疫检测工具，广泛应用于生物标志物定量分析。以下是关键信息总结：
一、基本原理
通过固相载体表面包被的抗体/抗原捕获目标分子，结合酶标记的二抗或抗原催化底物显色，显色强度与目标物浓度成正比。核心步骤包括固相化、免疫反应、酶催化及显色检测。
二、主要类型
双抗体夹心法：适用于大分子抗原(如细胞因子)，需两种特异性抗体分别结合抗原不同表位。
竞争法：适用于小分子物质(如激素)，样本与标记抗原竞争结合有限抗体。
其他类型：间接法(测抗体)、捕获法(测IgM)等。
三、试剂盒组成
固相载体：预包被抗体/抗原的微孔板。
酶标记物：辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗或抗原。
底物系统：常用TMB(四甲基联苯胺)，显色后终止反应测吸光度。
配套试剂：标准品、洗涤液、终止液等。
四、操作要点
样本处理：血清/血浆需避免溶血，细胞上清需离心去杂质，分装后冻存避免反复冻融。
标准曲线：推荐四参数或直线拟合，R²值需接近1。
加样与洗涤：精确控制加样量，洗涤需以减少背景信号。
五、应用场景
种属覆盖：人、小鼠、大鼠等，检测血清、血浆、细胞上清等样本。
灵敏度：可达pg/mL级(如小鼠IL-1β检测限23.44 pg/mL)。
领域：炎症因子、肿瘤标志物、激素等研究。
六、注意事项
试剂保存：未拆封4℃保存，拆后部分组分需-20℃冻存。
交叉验证：建议与Western blot或质谱法联用提高准确性。
如需具体试剂盒(如大鼠TNF-α检测)，可参考联科生物产品页或华美生物ELISA库。
注意：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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