小鼠Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PIICP)试剂盒实验原理

　　以下是天正信达关于‌小鼠Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PIICP)试剂盒实验原理‌ 的详细解析，综合相关搜索结果整理：

　　一、核心实验原理‌

　　双抗体夹心法(Sandwich ELISA)‌

　　将抗PIICP单克隆抗体预先包被于酶标板上，形成固相抗体‌。

　　样本中的PIICP与固相抗体结合后，加入生物素标记的抗PIICP二抗，形成“抗体-抗原-抗体"复合物‌。

　　通过链霉亲和素-辣根过氧化物酶(SABC/HRP)系统放大信号，TMB显色后测定OD值‌。

　　定量依据‌

　　PIICP浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算样本浓度‌。

　　二、关键实验步骤‌

　　样本处理‌

　　血清/血浆需避免溶血或脂血干扰，建议离心后取上清‌。

　　组织匀浆需充分裂解并去除沉淀‌。

　　标准曲线制备‌

　　标准品梯度稀释(如50ng/mL起始，倍比稀释至0.781ng/mL)‌。

　　显色与终止‌

　　TMB显色液反应后，硫酸终止变黄，450nm测OD值‌。

　　三、注意事项‌

　　温度控制‌：试剂需恢复至室温使用，避免反复冻融‌。

　　洗涤充分‌：避免残留未结合物导致假阳性‌。

　　批间差异‌：不同品牌试剂盒标准曲线可能需独立验证‌。

　　四、应用场景‌

　　骨代谢研究‌：PIICP水平反映Ⅱ型胶原合成速率，用于骨关节炎模型评估‌。

　　纤维化监测‌：如肺纤维化中胶原代谢异常检测‌。

　　如需进一步优化实验条件，可参考厂商提供的标准操作流程(SOP)‌。

　　注：以上资料仅供参考，具体请咨询品牌供应商或技术老师。

　　天津天正信达供应：RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材，开云在线登录拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台，主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。